新产品上线：mRNA疫苗生产所需原料

E00801 mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase（mRNA Cap2氧甲基转移酶）

货号：E00801

种属：Vaccinia

产品介绍：

mRNA Cap 2氧甲基转移酶（UCF.ME®  mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase）是一种来自于牛痘病毒的重组蛋白。该酶可以在RNA的5´末端紧挨帽结构的第一个核苷酸的2´-O位置处添加一个甲基基团。该酶利用SAM作为甲基供体来甲基化加帽RNA，从而形成Cap1结构。Cap1结构能增强mRNA的翻译效率，因此可有助于改善mRNA转染和显微注射实验中的表达。该酶需要有m7GpppN即7-甲基鸟苷帽结构的RNA作为底物。

保存条件：

冰袋运输。-20℃保存，一年稳定。建议分装保存，避免反复冻融。

酶活定义：

一单位（U）定义为：在37℃条件下1h内甲基化10pmol的80nt带帽RNA转录物所需的酶量。

使用方法：

1、使用RNase-free 水将适量 Capped RNA 稀释至16μl；

2、将稀释的RNA 在65℃条件下加热处理5min，反应后冰上放置 5min；

3、按下表（1）配置反应体系（适用于10μg以内Capped RNA的甲基化反应）；

4、37℃条件下孵育1h（对与目的片段长度小于200nt RNA，可将孵育时间增加到2h）；

5、10×Capping Buffer的配置如下：500mM Tris-HCl、pH8.0、50mM KCl、10mM MgCl2、10mM DTT。

表1：20μL反应体系配置

E00901 Ribonuclease HII-1 （核糖核酸酶 HII）

货号：E00901

种属：Pyrococcus abyssi

产品介绍：

核糖核酸酶 HII (RNase HII) 为核糖核酸内切酶,适用于在双链 DNA 内部切刻核糖核酸的 5 末端,产生 5 磷酸和 3 羟基末端。RNase HII 还可以在冈崎片段的RNA 部分进行多处切割。

保存条件：

冰袋运输。

-20℃保存，6个月稳定；-70℃长期保存，一年稳定。建议分装保存，避免反复冻融。

酶活定义：

1 单位指 1X ThermoPol 反应体系中,37℃条件下,30 分钟产生与切刻 100pmol 人工合成双链RNA 底物相同的荧光信号所需的酶量。该合成双链底物在荧光探针/淬火对的淬火域附近含有单个核糖核苷。

核糖核酸酶HII反应条件:

反应条件：1X 反应缓冲液 [10 mM KCl, 20 mM Tris-HCl, 10 mM (NH4)2SO4, 2mM MgSO4, 0.1% Triton X-100 (pH 8.8, 25℃) ]。37℃ 温育。

Buffer 成分：20 mM Tris-HCl,100 mM NaCl,1 mM DTT,1 mM EDTA,50%Glycerol。

灭活：与 0.1% SDS 一起温育足以灭活 RNase HII。

产品特点:

1. 重组酶

2. 除去杂交到 poly(dT) 上的 mRNA poly(A)

3. 在 cDNA 第二链合成时除去 mRNA

4. 无核酸内切酶、核酸外切酶和 RNase 污染。