E003-02 CRISPR-Cas13a，LwaCas13a (C2c2)

产品介绍：

Cas13a核酸酶（C2c2）是依赖于RNA介导的RNA内切核酸酶。Cas13a核酸酶（C2c2）与Cas9的区别。最大的区别在于Cas13a结合并切割RNA，而Cas9切割DNA。从结构上来看，Cas13a含有两个HEPN结构域，而Cas9用HNH和RuvC结构域来切割DNA目标。HEPN结构域对Cas13a切割RNA目标是必需的。另外，与Cas9类似，Cas13a分子中关键残基的突变可以形成核酸酶活性缺失的Cas13a（dCas13a），它能够结合RNA目标但无法切割。

此外，Cas13a一旦识别并切割由crRNA序列指定的RNA目标，它就转入了一种酶促“激活”状态，这时它将结合并切割其他的RNA，而不管它们是否与crRNA同源，或是否存在PFS。这一点与Cas9截然不同。这也称为旁路切割活性，可用于开发靶标核酸的快速检测试剂盒。Cas13a可以高特异性地检测RNA单分子。张锋团队开发出的SHERLOCK系统可检测血清、尿液和唾液中低浓度的寨卡病毒，并确定病毒载量，区分不同病毒株。它还可以对人类DNA进行基因分型，并鉴定游离DNA中的肿瘤突变。本产品中（包括Cas13a酶）都不含任何除Cas13a外的任何其他核酸酶活性。

图 Cas13a-crRNA（Cas13a RNP）示意图

产品说明：

古菌和细菌利用CRISPR-Cas系统抵御外源DNA浸染的Cas蛋白有多种，它们都是由向导RNA介导的切割目标DNA的DNA核酸内切酶，如Cas9，Cpf1，C2c1等，Cas9和Cpf1已成功开发为重要的基因编辑工具，它们可作为开展基因功能研究、寻找合适药物作用靶标的巧妙工具。Cas13a是VI型CRISPR-Cas系统效应蛋白，具有RNA介导的RNA酶切活性，是目前第二大类CRISPR-Cas系统发现的唯一能够降解RNA的蛋白，Cas9，Cpf1，C2c1均是由RNA介导的DNA核酸内切酶，对开发研究RNA工具，扩展CRISPR系统在基因编辑方面的运用具有重大价值。

产品特点：

本产品系由含有LwaCas13a基因的E.coli经发酵、分离和高度纯化后制成。

产品用途：

体外RNA切割；体外RNA检测；活细胞RNA的调控、RNA基因编辑；光学探针生物学标记。

规格参数：

货号：E003-02                    浓度：10000 pmol / ml                 规格：100 pmol / 500 pmol / 700 pmol。

质量控制：

纯度：经高效液相色谱（SEC-HPLC）和SDS-PAGE检测，纯度大于95%。

使用说明：

4℃运输；-20℃储存，长期储存于-80℃，避免反复冻融。

在-20℃条件下有效期24个月。

仅供科研或生产使用，不可直接应用于人体。

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参考文献：

[1] Gootenberg JS, et al. 2017. Science. 356(6336):438-442.

[2] Abudayyeh OO, et al. 2017. Nature. 550(7675):280-284.

[3] Wolter F, Puchta H. 2018. Plant J. 94(5):767-775.